تخفيف العينات وقانون التخفيف وكيفية عمل الفحوصات السيرولوجية م | امبراطورية المختبرات الطبيةDC MLS

تخفيف العينات وقانون التخفيف وكيفية عمل الفحوصات السيرولوجية مثل: ASO بطريقة التايتر dilution _ titer
-------------------
للاسف البعض يجهل الطرق العلمية لهذا الفحص، سواء في المختبرات العامة او الخاصة
وكما هو عهدنا بكم ان نبحث ونسعى وراء الحقيقة العلمية المؤكدة
وان لا يكون كلامنا مجرد احتمالات او تكهنات مثل رأينا مختبر يعمل كذا .. وشخص يشتغل كذا.الخ .. بدون مانسأل انفسنا هل صح ام خطأ !! وهل منهجه علمي ام تصنيف
وليس عيبا معرفة معلومة خاطئة !! ولكن العيب عدم تصحيح المعلومة ( وهذا مانسعى اليه في هذا الصرح العلمي)
-----------
التخفيف المتسلسل ( والذي سنقتصر على شرحه فقط»» لانه المستخدم في عمل فحوصات ASO, CRP, RF.. عادة.

اولا قانون التخفيف المتسلسل:
يقول: حجم العينة مقسوما على مجموع ( حجم العينة زائد حجم محلول التخفيف)
s v
------------
s v + d v
حيث:
S = sample
V = volume
d = diluted

مثال: اريد عمل فحص ASO !
قطرة من السيرم + قطرة من محلول الASO = اذا لم نرى تفاعل يرى بالعين.. هذا معناه ان تركيز ASO في الجسم اقل من 200 وحدة وهي النسبة الطبيعية المتواجدة والتي لايكشفها محلولنا... ويسجل التقرير
ASO = non reactive.
وخلصت العملية..
لو كان في هناك تفاعل وتخثر يرى !!
هنا اعمل التايتر ASO titer بالطريقة التالية:
1- احضر 3 تيوبات كحد ادنى (يمكن اربع او خمس..) وارقمها 1,2,3

2- اضع في كل تيوب 50 ميكرون من محلول التخفيف ( وليكن NS محلول ملحي)
3- اضع في التيوب رقم 1 فقط 50 ميكرون من سيرم العينة.
4 - الان تيوب رقم واحد.. نطبق عليه القانون وسنعرف كم نسبة التخفيف فيه:
Tube1= 50 1
---------- = -----
100 2
اذا تيوب واحد معامل تخفيفة = 1/2.ونقول تركيزه (واحد الى اثنين)
6- ننقل 50 ميكرون من تيوب رقم واحد الى تيوب رقم اثنين (بعد الرج mix ) .
7- وبما اننا اضفنا نفس الكمية وهذا شرط من شروط التخفيف، هذا يعني ان التخفيف في التيوب الثاني اتضاعف اربع مرات..لاننا بنضرب التيوب الثاني في معامل تخفيف التيوب الاول كالتالي:
Tube2: 50 1 1 1
------ =---× ---=----
100 2 2 4

8- ننقل نفس الكمية 50 ميكرون من التيوب الثاني الى التيوب الثالث وسوف يتضاعف ثمان مرات... معناه سنضرب في معامل ضرب التيوب الثاني 1/4..
كالتالي:
Tube3: 50 1 1 1
----- =---×--- =---
100 2 4 8

وهكذا في التيوب الرابع سيتضاعف الى 16 وهكذا...سلسلة من التخافيف المتوازنة في الكمية والمتضاعفة بالتركيز..

ليصبح لدينا هذه التخافيف

1/2 _ 1/4 _ 1/8 _ 1/16.....

وهذه الطريقة تطبق على جميع الفحوصات السيرولوجية، وبالمناسبة موجودة في ليفلت او اليوزرمانوال المرفق مع المحلول في الشركات الممتازة.
وفي اي كتاب او مرجع مناعة عملي، ويعمل بها منذ القرون الغابرة..!
فلا يمكن ان نضيف كميات خارج تلك السلسلة اعلاه !! والا شغلنا بيكون

اخيرا.. كيف بنسجل نتيجة ال ASO :
الجواب: نشوف التفاعل في ايها تيوب...ونضرب معامل ضرب ذالك التيوب ضرب النسبة الطبيعية لل.ASO..التي تساوي
ال 200
كالتالي:
Tube 1: 1/2 × 200 = 400
Tube 2: 1/4 × 200 = 800
Tube 3: 1/8 × 200 = 1600

وممكن تكتب هكذا:
1/400 _ 1/800_ 1/1600
--------------------
شكرا د وضاح