يوضع فى عبوه بعيدا عن الضوء ذات لون داكن لانه يتأثر بالضوء وبالتالى يؤثر على دقةالنتائج
1- يتم اضافة (10 ميكرون) من الدم (EDTA+ blood)..ونمسح برفق باقى الدم على التيبس من الخارج بويبس الى (2.5 مل) من محلول درابكن(W.S) وخلطهم جيدا
2- يتم تحضين العينة فى درجة حرارة الغرفة لمدة (3-5) دقيقة لضمان تحول الهيموجلوبين الى اللون البنى
3- يتم قياس العينة فى جهاز (spectrophotometer)بعد تصفير الحهاز بالمحلول
4- تقاس العينة بالجهاز عند الطول الموجى (540 نانوميتر)
5- يتم حساب العينة من خلال المعادلة التالية
Concentrationof Hb=Absorbance*36.77
اى انة يتم ضرب الرقم الناتج من الجهاز فى (36.77). Factor
6- كتابة النتائج النيل سعيدالنيل #ماهى مكونات محلول درابكن؟
#محلول درابكن يتكون من مادتين ..
**1- البوتاسيوم سيانيد.
**2- البوتاسيوم فيراسيانيد
. . The principle of Drabkin's solution: *This is based on oxidation of Hb and its derivatives except sulfhemoglobin to *form methemoglobin in the presence of alkaline K- ferricyanide. ***The methemoglobin reacts with K-cyanide to form a very stable compound, Cyanometh hemoglobine has maximum absorption at 540
#بعدقياس الهيموجلوبين والهيماتوكريت. وعد كرات الدم الحمراء
#نطبق المعادلات لاستخراج
Blood Index:.
Mean Corpuscular Volume (MCV) = HCT *10/ RBCs.
Mean Corpuscular Haemoglobin (MCV) = HB*10/ RBCs.
Mean Corpuscular Haemoglobin Concentration = HB*100 / HCT.
..#معلومة MCHC ممكن يطلع عالى بسبب أخطاء السحب
mchc = Hb * 100 / hct وبالتالي أي خطأ يرفع الهيموجلوبين يسبب علو MCHC كذلك أي خطأ يقلل قيمة الهيماتوكريت برضه يعلي MCHC
### خطأ زيادة الهيموجلوبين اما تكسير العينه او زياده. 10microبالطريقه المانيوال النيل سعيدالنيل ### الهيماتوكريت ممكن يطلع قليل عن طريق الخطأ ؟ #ممكن مثلا يبقى العينة مسحوبة على كمية كبيرة من الايديتا ، والايديتا بتعمل انكماش للخلايا فيقل حجمها وبيالتالي يقل الهيماتوكريت .
#ممكن يحصل هيموليسس وغالبا بيكون بسبب السحب فيقل عدد كرات الدم وبالتالي يقل الهيماتوكريت
استخراج قيمة Hb من قيمة HCt
هناك علاقة رياضية تربط بين قيمة PCV وبين قيمة Hb وهي حسب المعادلة اما Hb. = PCV ÷ 3 او PCV = Hb. X 3
هل هذه المعادلة صحيحة اغلب النتائج في الحالات الطبيعية تكون متقاربة .. لكن في كثير من حالات فقر الدم المتعلق بكبر او صغر حجم كرات الدم الحمراء (مثل: الثلاسيميا Thalassemia او انيميا نقص الحديد Iron deficiency anemia وغيرها ) تختلف القيمتان فقد يكون تركيز ال Hb طبيعيا لكن هناك خلل في حجم كرية الدم نفسها الامر الذي يجعل قيمة الPCV منخفضا والعكس صحيح الأمر الذي يجعل استخدام أو الاعتماد على تلك العلاقة الرياضية غير مبرر
المعادلات هذه لا تطبق الا في حالة كانت الخلايا الدم الحمراء RBCs طبيعية من نوع normochromic normocytic يعني الMCV و الMCH طبيعيين وغير ذلك لا تطبق الحل لايجاد قيمة الHb هو اما بطريقة محلول درابكن Drabkin solution او عن طريق اجهزة الCBC *النيل سعيدالنيل*